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顯微鏡
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用大豆酪蛋白瓊脂培養基檢測沉降菌

  用大豆酪蛋白瓊脂培養基檢測沉降菌測試方法
  方法概述
  本測試方法采用沉降法,即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養基平皿,經若干時間,在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數,以平板培養皿中的菌落數來判定潔凈環境內的活微生物數,并以此來評定潔凈室(區)的潔凈度。
  所用的儀器和設備
 ?、鸥邏合惧?/div>
  使用時應嚴格按照儀器說明書操作。
 ?、坪銣嘏囵B箱
  必須定期對培養箱的溫度計進行檢定。
 ?、桥囵B皿
  一般采用?90mm×15mm的硼硅酸玻璃培養皿。
 ?、扰囵B基
  普通肉湯瓊脂培養基或其他藥典認可的培養基。其配制方法見附錄A(標準的附錄)。
  測試步驟
 ?、挪蓸臃椒?/div>
  將已制備好的培養皿按5.4.1.2的要求放置,打開培養皿蓋,使培養基表面暴露0.5h,再將培養皿蓋蓋上后倒置。
 ?、婆囵B
 ?、偃坎蓸咏Y束后,將培養倒置于恒溫培養箱中培養。
 ?、谠?0℃~35℃培養箱中培養,時間不少于48h。
  ③每批培養基應有對照試驗,檢驗培養基本身是否污染??擅颗x定3只培養皿作對照培養。
 ?、蔷溆嫈?/div>
 ?、儆萌庋壑苯佑嫈?,標記或在菌落計數器上點計,然后用5~10倍放大鏡檢查,不否遺漏。
 ?、谌襞囵B皿上有2個或2個以上的菌落重疊,可分辨時仍以2 個或2個以上菌落計數。
  注意事項
 ?、艤y試用具要作滅菌處理,以確保測試的可靠性、正確性。
 ?、撇扇∫磺写胧┓乐谷藶閷颖镜奈廴?。
 ?、菍ε囵B基、培養條件及其他參數作詳細的記錄。
 ?、扔捎诩毦N類繁多,差別甚大,計數時一般用透射光于培養皿背面或正面仔細觀察,不要漏計培養皿邊緣生長的菌落,并須注意細菌菌落與培養基沉定物的區別,必要時用顯微鏡鑒別。
  ⑸采樣前應仔細檢查每個培養皿的質量,如發現變質、破損或污染的應剔除。
  測試規則
 ?、艤y試狀態
 ?、俪两稻鷾y試前,被測試潔凈室(區)的溫濕度須達到規定的要求,靜壓差、換氣次數、空氣流速必須控制在規定值內。
 ?、诔两稻鷾y試前,被測試潔凈室(區)已經過消毒。
  ③測試狀態有靜態和動態兩種,測試狀態的選擇必須符合生產的要求,并在報告中注明測試狀態。
 ?、茰y試人員
 ?、贉y試人員必須穿戴符合環境潔凈度級別的工作服。
 ?、陟o態測試時,室內測試人員不得多于二人。
 ?、菧y試時間
  ①對單向流,如100級凈化房間及層流工作臺,測試應在凈化空調系統正常運行不少于10min后開始。
 ?、趯Ψ菃蜗蛄?,如10 000級、100 000級以上的凈化房間,測試應在凈化空調系統正常運行不少于30min后開始。
 ?、瘸两稻嫈?/div>
  采樣點數目及其布置
 ?、谳^少采樣點數目
  沉降法的較少采樣點數可按表1確定。
  表1  較少采樣點數目
  在滿足較少測點數的同時,還宜滿足較少培養皿數,見表2。
  表2  較少培養皿數
 ?、鄄蓸狱c的布置
  采樣點的位置可以同懸浮粒子測試點。
 ?。┕ぷ鲄^采樣點的位置離地0.8m~1.5m左右(略高于工作面)。
 ?。┛稍陉P鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加采樣點。
  采樣點位置的詳細規則見附錄B(標準的附錄)。
  ⑸記錄
  測試報告中應記錄房間溫度、相對濕度、壓差及測試狀態。
  測試報告的編寫見附錄C(標準的附錄)。
  ⑹結果計算
 ?、儆糜嫈捣椒ǖ贸龈鱾€培養皿的菌落數。
 ?、谄骄鋽档挠嬎?,見式(1)。
  平均菌落數M=              ……………(1)
  式中:M——平均菌落數;
  ——1號培養皿菌落數;
  ——2號培養皿菌落數;
  ——n號培養皿菌落數;
  ——培養皿總數。
 ?、私Y果評定
  用平均菌落數判斷潔凈室(區)空氣中的微生物。
 ?、贊崈羰遥▍^)內的平均菌落數必須低于所選定的評定標準。
 ?、谌裟碀崈羰遥▍^)內的平均菌落數超過評定標準,則必須對此區域先進行消毒,然后重新采樣兩次,測試結果均須合格。
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